Acute and subchronic effects of petroleum on the freshwater fish Hoplias aff. malabaricus / Efeitos agudo e subcrônico do petróleo no peixe de água doce Hoplias aff. malabaricus

Abstract Petroleum water soluble fraction (WSF) impairs organisms, but damages may vary among cell and tissue levels. The aim of the present study was to evaluate the acute (24 h, 48 h, 72 h) and subchronic effects (36 days) of WSF (0%, 25% and 100%) in juveniles of the Neotropical top predator fish Hoplias aff. malabaricus. The effects of WSF were evaluated at a molecular level using the comet assay and micronucleus test for genome damage; and at a morphological level through histological identification of liver pathologic lesions. In both acute and subchronic exposure we found low levels of DNA damage (< 10% of comet tail) and non-significant frequency of micronucleus in WSF exposed fish. The most significant liver lesions in WSF exposed fish were fatty vacuolization, hypertrophy and focal necrosis. Since these tissue injuries were progressive and persistent, their irreversibility may negatively affect fish recruitment, even in a such resistant top predator.

Resumo A fração solúvel de petróleo (WSF) prejudica os organismos, porém os danos podem variar entre os níveis celular e tecidual. O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito agudo (24 h, 48 h e 72 h) e subcrônico (36 dias) da WSF (0%, 25% e 100%) em juvenis do peixe neotropical predador topo Hoplias aff. malabaricus. Os efeitos da WSF foram avaliados no nível molecular utilizando o ensaio do cometa e o teste do micronúcleo para o dano genômico e no nível morfológico através da identificação histológica de lesões patológicas no fígado. Em ambas exposições (aguda e subcrônica) encontramos baixos níveis de dano no DNA (< 10% de DNA na cauda do cometa) e frequência de micronúcleos não significativa em peixes expostos a WSF. As lesões mais significativas no fígado dos peixes expostos a WSF foram a vacuolização lipídica, hipertrofia e focos de necroses. Como estas lesões foram progressivas e persistentes, sua irreversibilidade pode afetar negativamente o recrutamento dos peixes, mesmo sendo um predador topo resistente.

Acute and subchronic effects of petroleum on the freshwater fish Hoplias aff. malabaricus

Abstract Petroleum water soluble fraction (WSF) impairs organisms, but damages may vary among cell and tissue levels. The aim of the present study was to evaluate the acute (24 h, 48 h, 72 h) and subchronic effects (36 days) of WSF (0%, 25% and 100%) in juveniles of the Neotropical top predator fish Hoplias aff. malabaricus. The effects of WSF were evaluated at a molecular level using the comet assay and micronucleus test for genome damage; and at a morphological level through histological identification of liver pathologic lesions. In both acute and subchronic exposure we found low levels of DNA damage ( 10% of comet tail) and non-significant frequency of micronucleus in WSF exposed fish. The most significant liver lesions in WSF exposed fish were fatty vacuolization, hypertrophy and focal necrosis. Since these tissue injuries were progressive and persistent, their irreversibility may negatively affect fish recruitment, even in a such resistant top predator.

Resumo A fração solúvel de petróleo (WSF) prejudica os organismos, porém os danos podem variar entre os níveis celular e tecidual. O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito agudo (24 h, 48 h e 72 h) e subcrônico (36 dias) da WSF (0%, 25% e 100%) em juvenis do peixe neotropical predador topo Hoplias aff. malabaricus. Os efeitos da WSF foram avaliados no nível molecular utilizando o ensaio do cometa e o teste do micronúcleo para o dano genômico e no nível morfológico através da identificação histológica de lesões patológicas no fígado. Em ambas exposições (aguda e subcrônica) encontramos baixos níveis de dano no DNA ( 10% de DNA na cauda do cometa) e frequência de micronúcleos não significativa em peixes expostos a WSF. As lesões mais significativas no fígado dos peixes expostos a WSF foram a vacuolização lipídica, hipertrofia e focos de necroses. Como estas lesões foram progressivas e persistentes, sua irreversibilidade pode afetar negativamente o recrutamento dos peixes, mesmo sendo um predador topo resistente.

Tartrazina induce genotoxicidad en linfocitos de BALB/c Mus musculus / Tartrazine induces genotoxicity in BALB/c Mus musculus lymphocytes

RESUMEN Objetivos. Determinar el efecto genotóxico de la tartrazina en linfocitos de sangre periférica de Mus musculus BALB/c. Materiales y métodos. Se realizó un estudio experimental, a través de cinco grupos, con cinco ratones en cada uno. Se les registró el peso durante 17 semanas y, en la semana 15 se les administró suero fisiológico (control negativo), dicromato de potasio 25 mg/kg de peso corporal (pc) (control positivo) y tartrazina a dosis de 0,75 mg/kg pc, 7,5 mg/kg pc y 75 mg/kg pc, durante siete días, a excepción del control positivo que fue en dosis única. Luego, cada 24 h se obtuvo una muestra de sangre periférica de la cola y se realizó el frotis, secado y coloración. Posteriormente, se realizó el conteo de 1000 linfocitos por muestra de cada ratón, en todos los tratamientos. Resultados. Los tres tratamientos con tartrazina no causaron diferencias significativas en el peso de ratones a la semana 15, pero sí produjeron diferencias significativas en la frecuencia de linfocitos micronucleados, siendo el tratamiento con tartrazina de 75 mg/kg pc el de mayor efecto genotóxico, induciendo un promedio de 1,63 ± 0,08 linfocitos micronucleados, comparado con el control positivo que generó un promedio de 1,42 ± 0,08 linfocitos micronucleados. Conclusiones. La tartrazina produjo un efecto genotóxico, incrementando el número de linfocitos micronucleados, a dosis de 0,75; 7,5 y 75 mg/kg pc y no afecta el peso corporal durante siete días de administración en M. musculus BALB/c.

ABSTRACT Objectives. To determine the genotoxic effect of tartrazine on peripheral blood lymphocytes of BALB/c Mus musculus. Materials and methods. An experimental study was carried out using five groups, with five mice in each group. Their weight was registered for 17 weeks, and at week 15 they were administered physiological saline solution (negative control), potassium dichromate at 25 mg/kg body weight (bw) (positive control) and tartrazine at doses of 0.75 mg/kg bw, 7.5 mg/kg bw and 75 mg/kg bw, for seven days, with the exception of the positive control which was a single dose. Then, every 24 hours, a peripheral blood sample was obtained from the tail, which was then smeared, dried and stained. Subsequently, 1000 lymphocytes were counted for each sample from each mouse, for all treatment groups. Results. The three tartrazine treatments did not cause significant differences in the weight of mice at week 15, but did produce significant differences in the frequency of micronucleated lymphocytes, with the 75 mg/kg bw tartrazine treatment having the greatest genotoxic effect, inducing an average of 1.63 ± 0.08 micronucleated lymphocytes, compared to the positive control which obtained an average of 1.42 ± 0.08 micronucleated lymphocytes. Conclusions. Tartrazine produced a genotoxic effect, increasing the number of micronucleated lymphocytes, at doses of 0.75; 7.5 and 75 mg/kg bw and did not affect body weight during seven days of administration to BALB/c M. musculus.

Micronucleus count in nasal epithelial cells from patients with chronic rhinosinusitis and polyps / Contagem de micronúcleos em células epiteliais nasais de pacientes com rinossinusite crônica e pólipos

Abstract Introduction: Chronic rhinosinusitis with nasal polyps, a prevalent disease affecting around 2% of the world population, is characterized by symptomatic inflammation of the nasal mucosa and impairment of quality of life. Chronic rhinosinusitis with nasal polyps has a multifactorial etiology, involving a dysfunctional host response to environmental factors. Thus, inflammatory models may be useful to shed light on the pathophysiology of this disease. Micronucleus count has been used to screen DNA damage in various tissues. Objective: To investigate the association between frequency of micronucleus in exfoliated cells from the nasal cavity of patients with chronic rhinosinusitis with nasal polyps and disease severity. Methods: This cross-sectional study included 21 patients with chronic rhinosinusitis with nasal polyps and 19 controls without disease. None of the participants were smokers. Results: Mean micronucleus count was 3.690 per 1000 cells (±2.165) in individuals with vs. 1.237 per 1000 cells (±0.806) in controls; (Student's t test = 4.653, p< 0.001). Nasal surgery in the past 5 years and aspirin-exacerbated respiratory disease were not associated with nicronucleus count (p= 0.251). Conclusion: Micronucleus count seems to be linked to chronic rhinosinusitis with nasal polyps, providing a new perspective for the evaluation of this disorder.

Resumo Introdução: A rinossinusite crônica com pólipos nasais, doença prevalente que afeta cerca de 2% da população mundial, é caracterizada por inflamação sintomática da mucosa nasal e comprometimento da qualidade de vida. A rinossinusite crônica com pólipos nasais tem etiologia multifatorial, envolvendo resposta disfuncional do hospedeiro a fatores ambientais. Assim, modelos inflamatórios podem ser úteis para esclarecer a fisiopatologia dessa doença. A contagem de micronúcleos tem sido usada para rastrear danos no DNA em vários tecidos. Objetivo: Investigar a associação entre a frequência de micronúcleos em células esfoliadas da cavidade nasal de pacientes com rinossinusite crônica com pólipos nasais e a gravidade da doença. Método: Estudo transversal que incluiu 21 pacientes com rinossinusite crônica com pólipos nasais e 19 controles sem doença. Nenhum dos participantes era fumante. Resultados: A contagem média de micronúcleos foi de 3,690 por 1.000 células (± 2,165) nos indivíduos doentes e 1,237 por 1.000 células (± 0,806) nos controles (teste t de Student = 4,653; p < 0,001). A cirurgia nasal nos últimos 5 anos e a doença respiratória exacerbada por aspirina não foram associadas à contagem de micronúcleos (p = 0,251). Conclusão: A contagem de micronúcleos parece estar ligada à rinossinusite crônica com pólipos nasais, proporcionando uma nova perspectiva para a avaliação dessa doença.

Avaliação do potencial quimioprotetor do fruto de Psidium guajava contra os efeitos genotóxicos da doxorrubicina / Evaluation of Psidium guajava fruit chemoprotective against the genotoxic effects of doxorubicin

Resumo Introdução A goiaba é um fruto amplamente utilizado como alimento e é considerada planta medicinal em países tropicais e subtropicais. Pesquisas têm mostrado que o fruto contém constituintes químicos com abrangente uso clínico. Além disso, a maior parte das substâncias utilizadas no tratamento contra câncer foi isolada a partir de produtos naturais. Objetivo Avaliar o potencial citotóxico, mutagênico, antimutagênico e quimioprotetor da fruta liofilizada de Psidium guajava, a goiaba, in vivo. Método A citotoxicidade, a mutagenicidade e a antimutagenicidade foram avaliadas em três diferentes dosagens (0,625, 1,25 e 2,50 g/kg) de goiaba. Resultados Os resultados mostraram que a goiaba não apresentou atividade citotóxica e mutagênica no ensaio de micronúcleo em sangue periférico e que não houve alterações nos valores de ALT e AST, indicando ausência de toxicidade hepática. Nos animais tratados com a goiaba, a dose de 0,625 mg/kg significativamente reduziu os danos induzidos pela doxorrubicina. Conclusão Esses resultados mostraram que o consumo de goiaba é seguro e capaz de proteger o material genético de alterações genômicas.

Abstract Background Guava is a fruit widely used as food and is considered a medicinal plant in the tropical and subtropical countries. Scientific research has shown that the fruit contains chemical constituents with comprehensive clinical use. In addition, most of the substances used in cancer treatment have been isolated from natural products. Objective To evaluate the cytotoxic, mutagenic, antimutagenic, and chemoprotective potential of the freeze-dried fruit of Psidium guajava, guava, in vivo. Method Cytotoxicity, mutagenicity, and antimutagenicity were evaluated in three different dosages (0.625, 1.25, 2.50 g/kg) of guava. Results The results show that guava does not present cytotoxic 2 and mutagenic activity in the micronucleus assay in peripheral blood and there were no alterations in ALT and AST values showing the absence of hepatic toxicity. In animals treated with guava, the dose of 0.625 mg/kg significantly reduced the damage induced by doxorubicin. Conclusion These results show that guava consumption is safe as it is also capable of protecting the genetic material from changes.

Evaluación genotóxica de las moléculas con efectos tripanocida y leishmanicida cantin-6-ona y 5-metoxicantin-6-ona en células de médula ósea de ratones / Genotoxic evaluation of the molecules with trypanocidal and leishmanicidal effects, canthin-6-one and 5-methoxycanthin-6-one in mouse bone marrow cells

La tripanosomiasis americana y la leishmaniasis son problemas de salud pública relevantes en Iberoamérica. Las drogas utilizadas actualmente para el tratamiento de estas enfermedades poseen efectos colaterales tóxicos severos. Varios grupos de investigación están abocados a la búsqueda de productos naturales y sintéticos para encontrar nuevos agentes terapéuticos efectivos que no presenten reacciones colaterales adversas. En la evaluación de compuestos de la especie vegetal Zanthoxylum chiloperone (Rutaceae), se demostró que compuestos aislados del extracto presentaban actividad leishmanicida, tripanocida y antifúngica in vivo. Teniendo como antecedentes estos resultados, en el presente estudio se evaluaron los efectos genotóxico y citotóxico del cantín-6-ona y del 5-metoxicantin-6-ona, moléculas aisladas de la planta, en células de médula ósea de animales tratados. El estudio de los efectos genotóxicos se hizo a través del ensayo de modificaciones en la frecuencia de micronúcleos y el efecto citotóxico por modificaciones en la relación entre eritrocitos policromáticos y eritrocitos normocromáticos. Se realizaron 2 ensayos independientes y en cada ensayo los animales fueron divididos en tres grupos de tratamiento: GRUPO I: control negativo que recibió 200 uL de agua y 2.1% de DMSO, vía oral, GRUPO II: compuesto a ser evaluado (canthin-6-ona o 5-methoxicantin-6-ona) con 2.1% de DMSO, y GRUPO III: control positivo que recibió ciclofosfamida 50mg/kg/peso del animal, vía intraperitoneal. El análisis estadístico mostró que ambos compuestos no presentaron efectos genotóxicos ni citotóxicos. Estos resultados permiten proponer a estas moléculas como candidatas a ser sometidas a estudios más detallados como potenciales fármacos contra estas dos enfermedades

American trypanosomiasis and leishmaniasis are relevant public health problems in Latin America. The drugs currently used to treat these diseases have severe toxic side effects. Several research groups are dedicated to the search of natural and synthetic products to find new effective therapeutic agents that do not present adverse collateral reactions. In the evaluation of compounds of the plant species Zanthoxylum chiloperone (Rutaceae), it was shown that isolated compounds of the extract had leishmanicidal, trypanocidal and antifungal in vivo activities. Based on these results, the genotoxic and cytotoxic effects of canthin-6-one and 5-methoxycanthin-6-one, molecules isolated from the plant, on bone marrow cells of treated mice were evaluated in the present study. The study of genotoxic effects was made through the test of modifications in the frequency of micronuclei and the cytotoxic effects by modifications in the relationship between polychromatic erythrocytes and normochromic erythrocytes. Two independent assays were performed and in each assay the animals were divided into three treatment groups: GROUP I: negative control that received 200 µL of water and 2.1% of DMSO, orally, GROUP II: compound to be evaluated (canthin-6 -one or 5-methoxycanthin-6-one) with 2.1% DMSO, and GROUP III: positive control that received cyclophosphamide 50mg /kg animal weight, intraperitoneal. Statistical analysis showed that both compounds had neither genotoxic nor cytotoxic effects. These results allow these molecules to be proposed as candidates to be subjected to more detailed studies as potential drugs against these two diseases

Comparison of micronuclei frequency between smokers and non-smokers: a systematic review / Comparação da frequência de micronúcleos entre indivíduos fumantes e não fumantes: uma revisão sistemática

ABSTRACT Introduction: Cancer results from the accumulation of several modifications in the genetic material and, therefore, it is possible to carry out its cytogenetic detection using biomarkers. Micronuclei (MN) have been addressed in the literature as biomarkers of genotoxic damage. These markers provide information on biological or biochemical changes in a target tissue at early stage, enabling a favorable prognosis. Objective: To compare whether the frequency of MN in active smokers is higher than that in non-smokers. Material and method: The search was performed in the Medical Literature Analysis and Retrieval System (PubMeb), in the Latin American and Caribbean Literature in Health Sciences (LILACS), and in the Scientific Electronic Electronic Library Online (SciELO), for articles published in the last ten years. Randomized clinical trials, with a cross-sectional design, which compared the MN frequency in the oral mucosa of adult smokers and non-smokers, were selected. Results: A total of 52 articles were identified, four of them were removed due to duplicity. From the remaining 48 studies, after reading their titles and abstracts, 14 remained, which had their full texts read. Finally, eight articles remained for the qualitative analysis. Discussion and conclusion: Individuals who use tobacco present genotoxic and cytotoxic damages that interfere in the mitosis process, which leads to MN formation. The hypothesis of smoking as the cause of this genetic alteration is corroborated by the authors when comparing the data obtained in their studies between risk groups and control groups.

RESUMEN Introducción: El cáncer es el resultado de la acumulación de diversas modificaciones en el material genético, por lo tanto, es posible realizar su detección citogenética usando biomarcadores. Micronúcleos (MN) se han abordado por la literatura como biomarcadores de daño genotóxico. Estos marcadores ofrecen información sobre cambios biológicos o bioquímicos en un tejido diana todavía en forma precoz, permitiendo un pronóstico bueno. Objetivo: Determinar si la frecuencia de MN en fumadores activos es superior a la de los no fumadores. Material y método: Hicimos una búsqueda en Medical Literature Analysis and Retrieval System (PubMeb), Literatura Latino-Americana e do Caribe em Ciências da Saúde (LILACS) y Scientific Eletronic Library On-line (SciELO) de artículos publicados en los últimos diez años. Hemos seleccionado ensayos clínicos aleatorizados, de diseño transversal, que compararon la frecuencia de MN en la mucosa bucal de personas adultas fumadoras y no fumadoras. Resultados: Se identificaron 52 artículos; cuatro de ellos fueron eliminados debido a duplicidad. Entre los 48 estudios restantes, tras la lectura de sus títulos y resúmenes, quedaron 14, que tuvieron sus textos completos leídos. Por último, ocho artículos permanecieron para el análisis cualitativo. Discusión y conclusión: Personas que utilizan tabaco presentan daños genotóxicos y citotóxicos que interfieren con el proceso de mitosis, lo que acarrea la formación de MN. La hipótesis del tabaquismo como causa de ese cambio genético es corroborada por los autores al cotejar los datos obtenidos en sus estudios entre grupos de riesgo y grupos de control.

RESUMO Introdução: O câncer é o resultado do acúmulo de diversas modificações no material genético, portanto, é possível realizar sua detecção citogenética utilizando biomarcadores. Micronúcleos (MN) têm sido abordados pela literatura como biomarcadores de danos genotóxicos. Esses marcadores fornecem informações sobre alterações biológicas ou bioquímicas em um tecido-alvo ainda de forma precoce, possibilitando um prognóstico favorável. Objetivo: Comparar se a frequência de MN em indivíduos fumantes ativos é superior à dos não fumantes. Material e método: Realizou-se a busca no Medical Literature Analysis and Retrieval System (PubMeb), no Literatura Latino-Americana e do Caribe em Ciências da Saúde (LILACS) e no Scientific Eletronic Library On-line (SciELO) de artigos publicados nos últimos dez anos. Foram selecionados ensaios clínicos randomizados, com delineamento transversal, que compararam a frequência de MN na mucosa bucal de indivíduos adultos fumantes e não fumantes. Resultados: Cinquenta e dois artigos foram identificados; quatro deles foram removidos devido à duplicidade. Dos 48 estudos restantes, após a leitura dos seus títulos e resumos, restaram 14, os quais tiveram seus textos completos lidos. Por fim, oito artigos permaneceram para a análise qualitativa. Discussão e conclusão: Indivíduos que utilizam tabaco apresentam danos genotóxicos e citotóxicos que interferem no processo de mitose, o que acarreta a formação de MN. A hipótese do tabagismo como causa dessa alteração genética é corroborada pelos autores ao confrontar os dados obtidos em seus estudos entre grupos de risco e grupos-controle.

Genotoxicity effects on Geophagus brasiliensis fish exposed to Doce River water after the environmental disaster in the city of Mariana, MG, Brazil / Efeitos da genotoxicidade em peixes da espécie Geophagus brasiliensis expostos a água do Rio Doce após o desastre ambiental na cidade de Marina, MG, Brasil

Abstract The Doce River basin has suffered the largest environmental accident ever occurred in Brazil with the influx of tailings from Fundão and Santarém, belonging to Samarco mining company, due to the disaster in Mariana. A spill between 50 and 60 million m3 of tailings was estimated by the company. According to Samarco, the wastewater was composed mainly of clay, silt and heavy metals like iron, copper and manganese. Thereby, the objective of the present study was evaluated the genotoxic damage in juvenile of Geophagus brasiliensis (Quoy e Gaimard, 1824) exposed to Doce river water before (DRWBA - Doce River water before acident) and after (DRWAA - Doce River water after acident) the influx of tailings from the Germano and Santarém Dam disasters in Mariana, MG, Brazil. For this, 24 individuals of the species G. brasiliensis (obtained on IFES/ALEGRE fish culture) were submitted to a bioassay with three treatments and eight replicates. The treatments were: 1) Control water (water from the urban water supply system, filtered with a 0.45 µm membrane), 2) DRBA and 3) DRAA. After 96 h, these fishes were anesthetized to remove blood for evaluation of genotoxic damage (micronucleus and comet). For the bioassay, a total of 80 L of The Doce River water were collected before the influx of tailings and after the influx and then submitted to metal quantification analysis. Fish exposed to DRWBA and DRWAA treatments showed a significant increase in both the number of erythrocyte micronuclei and the DNA damage index in relation to the control fish; however, they did not present any differences between the two treatments. The results demonstrate that the DRWBA treatment was already genotoxic for the fish, mainly due to dissolved Cu concentrations in the water. The DRWAA treatment probably presented genotoxicity due to the increase in the dissolved fraction and synergistic effects of several metals found in the tailings of the Mariana accident.

Resumo A bacia do Rio Doce sofreu o maior acidente ambiental com o influxo de rejeitos de Fundão e Santarém, pertencentes à empresa de mineração Samarco, devido ao desastre em Mariana. Um derramamento entre 50 e 60 milhões de m3 de rejeitos foi estimado pela empresa. De acordo com a Samarco, o rejeito despejado era composto principalmente de argila, silte e alguns metais pesados como ferro, cobre e manganês. Com isso, o presente estudo teve como objetivo avaliar os danos genotóxicos em juvenis de Geophagus brasilienses expostos a água do rio Doce antes (DRWAA - água do Rio Doce antes do acidente) e depois (DRWBA- água do Rio Doce depois do acidente) da chegada dos rejeitos do rompimento das barragens de Germano e Santarém em Mariana, MG, Brasil. Para isso, 24 indivíduos da espécie G. brasilienses (obtidos na piscicultura do IFES/ALEGRE) foram submetidos a um bioensaio com três tratamentos e oito réplicas. Os tratamentos eram: 1) Controle (com água do abastecimento urbano, filtrada com filtro analítico de 0,45 µm); 2) DRWBA e 3) DRWAA. Após um período de 96 h, esses peixes foram anestesiados para retirada de sangue para avaliação dos danos genotóxicos (micronúcleo e cometa). Para a realização do bioensaio, um total de 80 L de água do Rio Doce foram coletados antes da chegada dos rejeitos e outros 80 L foram coletados depois da chegada dos rejeitos e ambas foram submetidas a análises de quantificação de metal. Os peixes expostos ao DRWBA e ao DRWAA apresentaram um aumento significativo na quantidade de micronúcleos eritrocitários e no índice de danos do DNA em relação aos peixes controle, no entanto não apresentaram diferenças entre si. Os resultados obtidos demonstram que a DRWBA já era genotóxica para os peixes, principalmente, em função das concentrações de Cu dissolvido na água. A DRWAA apresentou genotixicidade, provavelmente, em função do aumento da fração dissolvida e do efeito sinérgico de diversos metais presentes nos rejeitos do acidente de Mariana.

Evaluation of aquatic contamination in an urban lagoon environment in a coastal region in the north of Brazil / Avaliação da contaminação aquática em uma laguna costeira urbana no norte do Brasil

The quality of water is related to how it is used and how its physical, chemical and biological conditions are evaluated. The use of different evaluation tools can therefore provide accurate data about the environmental quality of aquatic ecosystems. The objective of the present study was to evaluate the aquatic contamination of the Laguna da Jansen Ecological Park in São Luís, in the state of Maranhão, Brazil, using different tools (physical variables, microbiological analysis and erythrocytic and gill alterations in Oreochromis niloticus). The microbiological analysis of the water was based on the identification of the most probable number (MPN) of total and thermotolerant coliforms using a chromogenic and fluorogenic enzymatic substrate test (MUG), while the physical-chemical parameters determined were temperature, pH, turbidity and dissolved oxygen. The fish were captured and then anaesthetized for the blood collect by gill puncture. Blood smear slides were prepared and stained with modified Rosenfeld staining for the evaluation of erythrocyte alterations. For histopathological analysis of the gills, the second left branchial arch was removed from each specimen and fixed in 10% formaldehyde for 24 hours. These were subsequently decalcified in 10% nitric acid and histological protocols in paraffin. Large numbers of erythrocyte alterations, notably micronuclei, were identified. Among the most common branchial alterations were lamellar epithelium lifting, blood capillary dilation, aneurysms, and total and partial lamella fusion. The result of the microbiological analysis of the water revealed a quantity of thermotolerant coliforms than is permitted under current legislation. These results indicate that the health of the animals has been damaged, pointing out the poor quality of the water in the Laguna da Jansen.

A qualidade da água está relacionada ao tipo de uso da água e à avaliação de suas condições físicas, químicas e biológicas. O uso de diferentes ferramentas pode, portanto, fornecer dados precisos sobre a qualidade ambiental dos ecossistemas aquáticos. O objetivo do presente estudo foi avaliar a contaminação aquática do Parque Ecológico Laguna da Jansen, em São Luís, no estado do Maranhão, utilizando diferentes ferramentas (variáveis físicas, análises microbiológicas e alterações eritrocíticas e branquiais em Oreochromis niloticus). A análise microbiológica da água envolveu a identificação do número mais provável (NMP) de coliformes totais e termotolerantes utilizando um teste enzimático cromogênico e fluorogênico (MUG), enquanto a análise dos parâmetros físico-químicos determinou temperatura, pH, turbidez e oxigênio dissolvido. Os peixes foram capturados e em seguida anestesiados para coletada do sangue por punção branquial. As lâminas de esfregaço de sangue foram preparadas e coradas com coloração de Rosenfeld modificado para a avaliação das alterações eritrocitárias. Para análise histopatológica das brânquias, o segundo arco branquial esquerdo foi removido de cada espécime e fixado em formaldeído a 10% por 24 horas. Esses foram subsequentemente descalcificados em ácido nítrico a 10% e foram realizados protocolos histológicos em parafina. Alterações eritrocitárias, notadamente micronúcleos, foram identificadas em grandes quantidades. Entre as alterações branquiais mais comuns foram a elevação do epitélio lamelar, dilatação capilar sanguínea, aneurismas e fusão total e parcial da lamela. O resultado da análise microbiológica da água revelou uma quantidade de coliformes termotolerantes maior do que é permitido pela legislação vigente. Esses resultados indicam que a saúde dos animais foi danificada, apontando a má qualidade da água na Laguna da Jansen.

Reduction of doxorubicin-induced genotoxicity by Handroanthus impetiginosus in mouse bone marrow revealed by micronucleus assay / Redução da genotoxicidade induzida pela doxorrubicina por Handroanthus impetiginosus na medula óssea de camundongos revelada pelo ensaio do micronúcleo

Abstract Handroanthus impetiginosus has long been used in traditional medicine and various studies have determined the presence of bioactive chemical compounds and potential phytotherapeutics. In this study, the genotoxicity of the lyophilized tincture of H. impetiginosus bark (THI) was evaluated in mouse bone marrow using micronucleus assays. The interaction between THI and genotoxic effects induced by the chemotherapeutic agent, doxorubicin (DXR), was also analyzed. Experimental groups were evaluated 24 to 48 h after treatment with N-nitroso-N-ethylurea (NEU; 50 mg/kg), DXR (5 mg/kg), sodium chloride (NaCl; 150 mM), and THI (0.5-2 g/kg). Antigenotoxic assays were carried out using THI (0.5 g/kg) in combination with NEU or DXR. Analysis of the micronucleated polychromatic erythrocytes (MNPCEs) indicated no significant differences between treatment doses of THI (0.5-2 g/kg) and NaCl. Polychromatic erythrocyte (PCE) to normochromatic erythrocyte (NCE) ratios did not indicate any statistical differences between DXR and THI or NaCl, but there were differences between THI and NaCl. A significant reduction in MNPCEs and PCE/NCE ratios was observed when THI was administered in combination with DXR. This study suggested the absence of THI genotoxicity that was dose-, time-, and gender-independent and the presence of moderate systemic toxicity that was dose-independent, but time- and gender-dependent. The combination of THI and DXR also suggested antigenotoxic effects, indicating that THI reduced genotoxic effects induced by chemotherapeutic agents.

Resumo Handroanthus impetiginosus tem sido usada durante um longo período pela medicina tradicional e vários estudos têm demonstrados a presença de compostos químicos e potencial fitoterapêutico. Esta pesquisa avaliou a genotoxicidade da tintura da casca liofilizada de H. impetiginosus (THI) usando o ensaio do micronúcleo em medula óssea de camundongos. A interação entre THI e os efeitos genotóxicos induzidos pelo quimioterápico doxorrubicina (DXR) também foram analisados. Grupos experimentais foram analisados a 24-48 h após o tratamento com N-Nitroso-N-etiluréia (NEU; 50 mg/kg), DXR (5 mg/kg), NaCl (150 mM) e THI (0,5-2 g/kg). O ensaio antigenotóxico foi conduzido utilizando THI (0,5 g/kg) em combinação com NEU ou DXR. A análise de eritrócitos policromáticos micronucleados (EPCMNs) não mostrou diferenças significativas entre as doses de tratamento (0,5-2 g/kg) e NaCl. As proporções de eritrócitos policromáticos (EPC)/eritrócitos normocromáticos (ENC) não revelaram diferenças estatísticas entre DXR e THI ou NaCl, porém houve diferenças entre THI e NaCl. Uma redução significativa em EPCMNs e na razão EPC/ENC foi observada quando THI foi administrado em combinação com DXR. Essa pesquisa sugere ausência de genotoxicidade de THI, dose-, tempo- e sexo-independente, e moderada toxicidade sistêmica dose-independente, mas tempo- e sexo-dependente. A associação do THI e DXR também sugere efeitos antigenotóxicos. Por conseguinte, THI pode reduzir os efeitos genotóxicos induzidos pelo quimioterapêutico.

Induced CYP1A activity and DNA damage in fish from the middle Paraíba do Sul River basin, southeastern Brazil / Atividade induzida de CYP1A e danos de DNA em peixes do trecho médio da bacia do rio Paraíba do Sul, sudeste do Brasil

The Paraíba do Sul River (PSR) drainage basin in Southeastern Brazil covers one of the most industrialized and densely populated regions of the country. The impact of chemical contamination on the PSR basin seems to be more pronounced in its middle reach where a number of potentially polluting plants are located. In this study, we used hepatic EROD activity - a biomarker of exposure to CYP1A-inducing pollutants (e.g. PAHs, PCDD/Fs, PCBs) - and the incidence of micronucleated erythrocytes (Mn) in the peripheral blood - a biomarker of effects of DNA-damaging agents (e.g. PAHs) - to evaluate the effects of pollution on two native fish species, Geophagus brasiliensis and Pimelodus maculatus. Results showed that the incidence of Mn and EROD in G. brasiliensis and P. maculatus from the two most downstream sites (Três Rios Town and Piabanha River) were markedly higher than the incidence of Mn and EROD recorded in fish from the most upstream site (Funil Reservoir). Our findings are consistent with the view that CYP1A-inducing activity and increased DNA-damage are found in fish caught in sampling sites located downstream of the stretch where there are several industries that are potential sources of PAHs and CYP1A-inducing contaminants.

O rio Paraíba do Sul (RPS) drena uma das mais industrializadas e densamente povoadas áreas do sudeste do Brasil. O impacto de contaminação química no RPS parece ser mais pronunciado no segmento médio da bacia onde se localiza grande número de indústrias potencialmente poluidoras. Neste estudo, foi avaliada a atividade hepática EROD – um biomarcador de exposição a poluente indutores da CYP1A (e.g. HAPs, PCDD/Fs, PCBs) – e a incidência de eritrócitos micronucleados (Mn) no sangue periférico – um biomarcador de efeitos de agentes de danificação do DNA- (e.g. HAPs) – para avaliar o efeito de poluição sobre dois peixes nativos, Geophagus brasiliensis e Pimelodus maculatus. Os resultados apresentaram que a incidência de Mn e EROD em G. brasiliensis e P. maculatus nos dois locais no trecho mais baixo (Três Rios e rio Piabanha) foi marcadamente mais elevada do que a incidência e a atividade EROD registradas em peixes dos locais mais à montante (reservatório do Funil). Estes resultados são consistentes com a visão de que atividade indutora de CYP1A e elevadora de danos no DNA são encontradas em peixes capturados em locais abaixo do trecho onde grande número de indústrias são potenciais fontes de poluição de indutores de contaminantes HAPs e CYP1A.

Comparison of nuclear abnormalities in Astyanax bifasciatus Cuvier, 1819 (Teleostei: Characidae) of two sections of rivers from the middle Iguaçu / Comparação de anormalidades nucleares em Astyanax bifasciatus Cuvier, 1819 (Teleostei: Characidae) de dois trechos de rios do médio Iguaçu

Most changes in water bodies are result of human activities that have the potential to undermine the environmental integrity of aquatic ecosystems. Changes in genetic material can be evidenced by the frequency of nuclear abnormalities in fish blood cells, in response to genotoxic agents even at low concentrations. Thus, we aimed at comparing the frequencies of nuclear abnormalities of fish kept in acclimation, with fish collected in Timbó river (Santa Cruz do Timbó, Santa Catarina State), under low anthropogenic interference, and fish collected in Iguaçu river (União da Vitória, Paraná State), a polluted river. The highest frequency of changes in nuclear morphology of fish erythrocytes was found in the urbanized area around the Iguaçu river, while, the fish collected in areas with preserved riparian forest surrounding the Timbó river and acclimated fish showed no morphological changes. Our results suggest that genotoxic compounds in the Iguaçu river are acting as stressors to aquatic communities, especially fish. In addition, the absence of nuclear abnormalities in fish from the Timbó river suggests that rivers without significant environmental changes can serve as reference point for comparative studies of genetic modifications for the species studied.

A maioria das alterações dos corpos hídricos é resultante das atividades antrópicas que são prejudiciais à integridade ambiental dos ecossistemas aquáticos. Alterações no material genético podem ser evidenciadas pela frequência de anormalidades nucleares em peixes, em resposta a agentes genotóxicos, mesmo em baixas concentrações. Dessa forma, o estudo consistiu em comparar as frequências de anormalidades nucleares de peixes mantidos em aclimatação, com peixes coletados no rio Timbó (Santa Cruz do Timbó, Estado de Santa Catarina), local com pouca interferência antropogênica e, peixes coletados no rio Iguaçu (União da Vitória, Estado do Paraná), um rio poluído. As maiores frequências de alterações na morfologia nuclear dos eritrócitos dos peixes foram visualizadas na área urbanizada ao redor do rio Iguaçu, quando comparados com os peixes coletados em área com mata ciliar preservada, no rio Timbó, e os peixes aclimatados, que não apresentaram alterações morfológicas. Esses resultados sugerem que há compostos genotóxicos no trecho médio do rio Iguaçu que são estressores para os peixes. Além disso, a não observação de anormalidades nucleares no rio Timbó sugere que rios sem alterações ambientais podem servir como ponto de referência para estudos comparativos de modificações genéticas para a espécie estudada.

Effects of manganese on fat snook Centropomus parallelus (Carangaria: Centropomidae) exposed to different temperatures

This study evaluates the effects of exposure to manganese (Mn2+) for 96 hours at two different temperatures (24 and 27°C) on juveniles of Centropomus parallelus through the activities of glutathione S-transferase (GST) and catalase (CAT), micronuclei test (MN) and comet assay. The GST activity did not show any significant difference between the groups exposed to Mn2+ and the respective control groups; in contrast, a major increase in the CAT activity was observed at 27°C in the group exposed to Mn2+ compared to the control group. The genotoxic analyses showed that in all animals exposed to Mn2+, the number of red cells with micronuclei increased significantly compared to the respective control groups. There was also a significant increase in the incidence of DNA damage in the groups exposed to Mn2+. At a temperature of 24ºC, animals exposed to Mn2+ had more DNA damage than those at 27°C. It is likely that the increase in temperature can also induce oxidative stress. Thus, we conclude that manganese is toxic to the fat snook juveniles, causing genotoxic damage, and when associated with an increase in temperature, manganese can also provoke an increase in oxidative stress.(AU)

Este estudo avaliou os efeitos da exposição ao manganês (Mn2+), após 96 horas, a duas temperaturas (24 e 27°C) em juvenis de Centropomus parallelus por meio de análises bioquímicas (atividade das enzimas glutationa S-transferase (GST) e catalase (CAT)) e genotóxicas (teste do micronúcleo e ensaio cometa). A atividade da GST não mostrou diferença significativa entre os grupos expostos ao Mn2+ e os seus respectivos grupos controle, enquanto que um aumento significativo na atividade da CAT foi observado a 27°C no grupo exposto ao Mn2+, quando comparado ao grupo controle. As análises genotóxicas mostraram que os animais expostos ao Mn2+ tiveram aumento significativo na quantidade de células com micronúcleo em relação aos seus grupos de controles. Houve também aumento significativo na incidência de danos ao DNA nos grupos expostos a esse contaminante. Na temperatura de 24°C, os animais expostos ao Mn2+ tiveram maior quantidade de danos no DNA em relação a 27°C. É provável que o aumento da temperatura também possa induzir o estresse oxidativo. Assim, concluímos que o manganês é tóxico para os juvenis de robalo, causando dano genotóxico, e quando associado a um aumento da temperatura, também pode provocar um aumento no estresse oxidativo.(AU)

Genetic stability in synthetic wheat accessions: cytogenetic evaluation as a support in breeding programs / Estabilidade genética em acessos de trigos sintéticos: avaliação citogenética como apoio em programas de melhoramento genético

ABSTRACT: Synthetic wheat is developed by crossing tetraploid species ( Triticum turgidum , AABB) with a diploid species ( Aegilops tauschii , DD), followed by chromosome duplication through the use of colchicine to restore the resultant sterile hybrid to a fertile hexaploid plant. The main importance of producing synthetically improved wheat is to increase their genetic variability and to incorporate genes that code for resistance to biotic and abiotic stressors. This study aimed to evaluate the presence of micronuclei (MN) and the meiotic index (MI) in the tetrad phase in synthetic wheat accessions and cultivars ( Triticum aestivum ) stored at the Germplasm Bank of Embrapa Trigo (Brazil), in order to identify and select genetically stable accessions for plant improvement. Five plants were collected by genotype, prior to anthesis, and the tissues were fixed in Carnoy solution. Cytological slides were prepared by the smash method, and the cells were dyed with 1% acetocarmine and observed under an optical microscope. Presence of MN was observed in all genotypes analyzed, and variability of genetic stability was reported in the two years of analysis. In 2014, the highest MI of synthetic wheat accessions was 96.86% and the lowest was 46.32%. In 2015, the highest MI was 96.60% and the lowest was 47.96%. Based on the results, some genotypes were considered meiotically stable and suitable for use in wheat breeding programs.

RESUMO: Trigos sintéticos são resultados do cruzamento entre uma espécie tetraploide ( Triticum turgidum, AABB) e uma espécie diploide ( Aegilops tauschii , DD) originando um híbrido estéril, seguido por duplicação cromossômica, por meio de colchicina, para restabelecer um trigo hexaploide fértil. A principal importância do uso de trigos sintéticos no melhoramento é que possibilitam aumentar a variabilidade genética, bem como introgredir genes de resistência a estresses bióticos e abióticos. O presente estudo teve como objetivo avaliar a presença de micronúcleos (MCN) e índice meiótico (IM) na fase de tétrades, em acessos de trigos sintéticos e cultivares testemunhas ( T. aestivum ), armazenadas no Banco de Germoplasma da Embrapa Trigo, a fim de selecionar os acessos estáveis geneticamente e disponibilizar ao melhoramento. Cinco plantas por genótipos, na fase anterior à antese, foram coletadas e fixadas em solução Carnoy. As lâminas citológicas foram preparadas pelo método de maceração e a coloração das células com carmim acético 1%. As observações foram em microscópio óptico. Observou-se a presença de micronúcleos em todos os genótipos analisados e foi encontrado variabilidade quanto à estabilidade genética nos dois anos de análises. Em 2014, o percentual máximo de IM dos acessos de trigos sintéticos foi de 96,86% e o mínimo de 46,32%. Em 2015, o percentual de IM máximo foi de 96,60% e o mínimo de 47,96%. Com base nos resultados, alguns genótipos foram considerados meioticamente estáveis e, poderão ser utilizados em programas de melhoramento genético de trigo.

Reduction of doxorubicin-induced genotoxicity by Handroanthus impetiginosus in mouse bone marrow revealed by micronucleus assay

Abstract Handroanthus impetiginosus has long been used in traditional medicine and various studies have determined the presence of bioactive chemical compounds and potential phytotherapeutics. In this study, the genotoxicity of the lyophilized tincture of H. impetiginosus bark (THI) was evaluated in mouse bone marrow using micronucleus assays. The interaction between THI and genotoxic effects induced by the chemotherapeutic agent, doxorubicin (DXR), was also analyzed. Experimental groups were evaluated 24 to 48 h after treatment with N-nitroso-N-ethylurea (NEU; 50 mg/kg), DXR (5 mg/kg), sodium chloride (NaCl; 150 mM), and THI (0.5-2 g/kg). Antigenotoxic assays were carried out using THI (0.5 g/kg) in combination with NEU or DXR. Analysis of the micronucleated polychromatic erythrocytes (MNPCEs) indicated no significant differences between treatment doses of THI (0.5-2 g/kg) and NaCl. Polychromatic erythrocyte (PCE) to normochromatic erythrocyte (NCE) ratios did not indicate any statistical differences between DXR and THI or NaCl, but there were differences between THI and NaCl. A significant reduction in MNPCEs and PCE/NCE ratios was observed when THI was administered in combination with DXR. This study suggested the absence of THI genotoxicity that was dose-, time-, and gender-independent and the presence of moderate systemic toxicity that was dose-independent, but time- and gender-dependent. The combination of THI and DXR also suggested antigenotoxic effects, indicating that THI reduced genotoxic effects induced by chemotherapeutic agents.

Resumo Handroanthus impetiginosus tem sido usada durante um longo período pela medicina tradicional e vários estudos têm demonstrados a presença de compostos químicos e potencial fitoterapêutico. Esta pesquisa avaliou a genotoxicidade da tintura da casca liofilizada de H. impetiginosus (THI) usando o ensaio do micronúcleo em medula óssea de camundongos. A interação entre THI e os efeitos genotóxicos induzidos pelo quimioterápico doxorrubicina (DXR) também foram analisados. Grupos experimentais foram analisados a 24-48 h após o tratamento com N-Nitroso-N-etiluréia (NEU; 50 mg/kg), DXR (5 mg/kg), NaCl (150 mM) e THI (0,5-2 g/kg). O ensaio antigenotóxico foi conduzido utilizando THI (0,5 g/kg) em combinação com NEU ou DXR. A análise de eritrócitos policromáticos micronucleados (EPCMNs) não mostrou diferenças significativas entre as doses de tratamento (0,5-2 g/kg) e NaCl. As proporções de eritrócitos policromáticos (EPC)/eritrócitos normocromáticos (ENC) não revelaram diferenças estatísticas entre DXR e THI ou NaCl, porém houve diferenças entre THI e NaCl. Uma redução significativa em EPCMNs e na razão EPC/ENC foi observada quando THI foi administrado em combinação com DXR. Essa pesquisa sugere ausência de genotoxicidade de THI, dose-, tempo- e sexo-independente, e moderada toxicidade sistêmica dose-independente, mas tempo- e sexo-dependente. A associação do THI e DXR também sugere efeitos antigenotóxicos. Por conseguinte, THI pode reduzir os efeitos genotóxicos induzidos pelo quimioterapêutico.

Genotoxicity effects on Geophagus brasiliensis fish exposed to Doce River water after the environmental disaster in the city of Mariana, MG, Brazil

Abstract The Doce River basin has suffered the largest environmental accident ever occurred in Brazil with the influx of tailings from Fundão and Santarém, belonging to Samarco mining company, due to the disaster in Mariana. A spill between 50 and 60 million m3 of tailings was estimated by the company. According to Samarco, the wastewater was composed mainly of clay, silt and heavy metals like iron, copper and manganese. Thereby, the objective of the present study was evaluated the genotoxic damage in juvenile of Geophagus brasiliensis (Quoy e Gaimard, 1824) exposed to Doce river water before (DRWBA Doce River water before acident) and after (DRWAA Doce River water after acident) the influx of tailings from the Germano and Santarém Dam disasters in Mariana, MG, Brazil. For this, 24 individuals of the species G. brasiliensis (obtained on IFES/ALEGRE fish culture) were submitted to a bioassay with three treatments and eight replicates. The treatments were: 1) Control water (water from the urban water supply system, filtered with a 0.45 µm membrane), 2) DRBA and 3) DRAA. After 96 h, these fishes were anesthetized to remove blood for evaluation of genotoxic damage (micronucleus and comet). For the bioassay, a total of 80 L of The Doce River water were collected before the influx of tailings and after the influx and then submitted to metal quantification analysis. Fish exposed to DRWBA and DRWAA treatments showed a significant increase in both the number of erythrocyte micronuclei and the DNA damage index in relation to the control fish; however, they did not present any differences between the two treatments. The results demonstrate that the DRWBA treatment was already genotoxic for the fish, mainly due to dissolved Cu concentrations in the water. The DRWAA treatment probably presented genotoxicity due to the increase in the dissolved fraction and synergistic effects of several metals found in the tailings of the Mariana accident.

Resumo A bacia do Rio Doce sofreu o maior acidente ambiental com o influxo de rejeitos de Fundão e Santarém, pertencentes à empresa de mineração Samarco, devido ao desastre em Mariana. Um derramamento entre 50 e 60 milhões de m3 de rejeitos foi estimado pela empresa. De acordo com a Samarco, o rejeito despejado era composto principalmente de argila, silte e alguns metais pesados como ferro, cobre e manganês. Com isso, o presente estudo teve como objetivo avaliar os danos genotóxicos em juvenis de Geophagus brasilienses expostos a água do rio Doce antes (DRWAA água do Rio Doce antes do acidente) e depois (DRWBA- água do Rio Doce depois do acidente) da chegada dos rejeitos do rompimento das barragens de Germano e Santarém em Mariana, MG, Brasil. Para isso, 24 indivíduos da espécie G. brasilienses (obtidos na piscicultura do IFES/ALEGRE) foram submetidos a um bioensaio com três tratamentos e oito réplicas. Os tratamentos eram: 1) Controle (com água do abastecimento urbano, filtrada com filtro analítico de 0,45 µm); 2) DRWBA e 3) DRWAA. Após um período de 96 h, esses peixes foram anestesiados para retirada de sangue para avaliação dos danos genotóxicos (micronúcleo e cometa). Para a realização do bioensaio, um total de 80 L de água do Rio Doce foram coletados antes da chegada dos rejeitos e outros 80 L foram coletados depois da chegada dos rejeitos e ambas foram submetidas a análises de quantificação de metal. Os peixes expostos ao DRWBA e ao DRWAA apresentaram um aumento significativo na quantidade de micronúcleos eritrocitários e no índice de danos do DNA em relação aos peixes controle, no entanto não apresentaram diferenças entre si. Os resultados obtidos demonstram que a DRWBA já era genotóxica para os peixes, principalmente, em função das concentrações de Cu dissolvido na água. A DRWAA apresentou genotixicidade, provavelmente, em função do aumento da fração dissolvida e do efeito sinérgico de diversos metais presentes nos rejeitos do acidente de Mariana.

Evaluación de los efectos mutagénicos/antimutagénicos de Luehea divaricata en ratones / Evaluation of the mutagenic / antimutagenic effects of Luehea divaricata in mice

La Luehea divaricata Mart. conocida popularmente en el Paraguay como "ka´aovetî o ka´aovetîpytâ", es una planta nativa de la región utilizada como fitoterápico. El objetivo de este trabajo fue el de investigar el efecto protector del extracto acuoso de las hojas de L. divaricata frente al quimioterápico ciclofosfamida, en médula ósea de ratones. Los animales fueron divididos en 4 grupos de 5 animales cada uno; el Grupo I, control negativo, que recibió 200 µL de agua, vía oral; el Grupo II, que recibió 200 µL del extracto acuoso de L. divaricata; el Grupo III, que recibió 200 µL del extracto acuoso de L. divaricata y ciclofosfamida, 50 mg/Kg de peso de animal y el Grupo IV, fue el control positivo, recibió ciclofosfamida 50mg/Kg/peso de animal. El extracto acuoso de L. divaricata fue administrado por vía oral y el tratamiento se administró por 48h, la ciclofosfamida fue administrada por vía intraperitoneal 24h antes del sacrifico del animal .Se extrajo la médula ósea de los animales y se realizó el ensayo de micronúcleo en todas las muestras. Los resultados indicaron que el extracto acuoso de L. divaricata no presentó actividad mutagénica, cuando combinado con el agente mutagénico induce una reducción de hasta 49% en la frecuencia de micronúcleos, al ser comparado con el tratamiento con ciclofosfamida, sugiriendo un potencial efecto protector frente a agentes tóxicos.

The Luehea divaricata Mart. is a plant native, popularly known in Paraguay as "ovetîka'a”or “ovetîka'aPytá" of the region used as herbal medicines. The aim of this study was toinvestigate the protective effect of aqueous extract from the leaves of L. divaricata versuscyclophosphamide chemotherapy. The animals were divided in 4 groups and each grouphave 5 animals, Group I, negative control, which received 200 uL of water, orally; Group II,which received 200 uL of aqueous extract of L. divaricata; Group III, which received 200 uLof the aqueous extract of L. divaricata and cyclophosphamide, 50 mg / kg animal weight;Group IV, positive control, cyclophosphamide received 50mg / kg / animal weight. Theaqueous extract of L. divaricata was orally administered and the treatment wasadministered for 48 hs, cyclophosphamide was administered intraperitoneal and had 24hours of treatment. Bone marrow of the animals is removed and micronucleus assay wasperformed on all samples. The results indicated that aqueous extract of L. divaricata showedno mutagenic activity and when combined with the mutagen agent induces a reduction ofup to 41% in the frequency of micronucleus, when compared to treatment withcyclophosphamide, suggesting a potential protective effect against toxic agents.

Mutagenic effect of contaminated soil on the offspring of exposed rats / Efeito mutagênico da exposição a solos contaminados sobre a prole

This study aimed to measure irreversible DNA damage in the offspring of rats exposed to contaminated soil. Bone marrow cells were removed from the femurs of the offspring of rats that were exposed to contaminated soil via gavage during three different periods: 21 days prior to detection of pregnancy, during pregnancy and 21 days after birth, during the lactation period. For each group, we also had a control group under the same experimental conditions but exposed to uncontaminated soil. The results showed that pups borne of rats exposed to contaminated soil had an increase in the number of micronuclei in the different exposure groups compared with their respective control groups. This suggests a potential risk of mutagenic damage to the offspring of pregnant women who live at the sampling site.

Este estudo objetivou medir os danos irreversíveis de DNA na prole de ratas expostas a um solo contaminado, através do teste do micronúcleo. O mesmo foi realizado na medula óssea retirada do fêmur de filhotes de ratas expostas, via gavagem, em três diferentes períodos, ratas expostas durante 21 dias antes da detecção da prenhez, durante a prenhez e 21 dias após o nascimento, durante o período de aleitamento. Para cada grupo foi utilizado um grupo controle, mantido nas mesmas condições experimentais e expostos a um solo não contaminado. Os resultados obtidos nos filhotes expostos ao solo contaminado mostraram um aumento no número de micronúcleos nos três diferentes grupos expostos quando comparados aos seus respectivos grupos controle. Assim, os dados sugerem um potencial risco de dano mutagênico aos descendentes das gestantes residentes no local de amostragem.

Avaliação de danos genéticos e apoptose em mulheres menopausadas que fazem uso da terapia de reposição hormonal / Assessment of genetic damage and apoptosis in postmenopausal women under hormone replacement therapy

Objetivo: Avaliar por meio do teste de micronúcleo em células esfoliadas da mucosa oral a genotoxicidade de hormônios empregados na terapia de reposição hormonal (TRH). Material e métodos: Quarenta mulheres menopausadas foram selecionadas e distribuídas em quatro grupos de dez: G0 (não submetidas à TRH), G1 (TRH com estrógeno), G2 (TRH com estrógeno e progestágeno) e G3 (TRH com tibolona). Células esfoliadas da mucosa oral foram coletadas e processadas para análise, sob microscopia óptica, de danos cromossômicos (micronúcleos) e de apoptose, inferida pelo somatório de alterações nucleares degenerativas (picnose, cariorréxis e cromatina condensada). Duas mil células foram analisadas por participante. A análise estatística foi feita com o uso do teste condicional para comparação de proporções em situação de eventos raros. Resultados: A frequência de micronúcleo não diferiu entre os grupos (p > 0,05). As alterações nucleares indicativas de apoptose foram significativamente mais altas entre as mulheres do G0 em relação às dos demais grupos (p < 0,01). Os grupos submetidos à TRH não diferiram quanto à ocorrência de apoptose (p > 0,05). Conclusões: Esses resultados indicam que, tal como avaliado neste estudo, a TRH não induz danos cromossômicos. Entretanto, devido ao efeito antiapoptótico, permite a proliferação de células geneticamente danificadas, está assim potencialmente associada ao processo de transformação maligna.(AU)

Objective: To evaluate through the micronucleus test in exfoliated cells of oral mucosa the genotoxicity of hormones used in hormone replacement therapy (HRT). Material and methods: Forty postmenopausal women were selected and divided into four groups of ten: G0 (not submitted to HRT), G1 (HRT with estrogen), G2 (HRT with estrogen and progestogen) and G3 (HRT with tibolone). Exfoliated cells of oral mucosa were collected and processed for analysis of chromosomal damage (micronuclei) and apoptosis, inferred by the sum of nuclear degenerative alterations (picnosis, cariorréxis and condensed chromatin). Two thousand cells were analyzed by participant. Statistical analysis was performed using the conditional test to compare proportions in a situation of rare events. Results: The frequency of micronuclei did not differ between groups (p > 0.05). Apoptotic cells were significantly higher among women from G0 when compared to the other groups (p < 0.01). The groups submitted to HRT did not differ in apoptosis occurrence (p > 0.05). Conclusions: These results indicate that, as assessed in this study, TRH does not induce chromosomal damage, however, due to the anti-apoptotic effect, cells genetically damaged can proliferate, favoring the malignant transformation process.(AU)

Biomonitoring the genotoxic potential of the air on Tradescantia pallida var. purpurea under climatic conditions in the Sinos River basin, Rio Grande do Sul, Brazil / Biomonitoramento do potencial genotóxico do ar em Tradescantia pallida var. purpurea sob condições climáticas na bacia do Rio dos Sinos, Rio Grande do Sul, Brasil

Abstract The present study evaluated the genotoxic effects of the atmospheric air on Tradescantia pallida var. purpurea in urban areas with different intensities of vehicular traffic and in riparian forest fragments in the Sinos River Basin (Rio Grande do Sul, Brazil), considering the influence of climatic conditions prevailing in these environments. Bimonthly, from May 2012 to March 2013, cuttings with flower buds were exposed for 8 h in urban and riparian forest environments in the municipalities of Caraá, Taquara and Campo Bom in the upper, middle and lower sections, respectively, of the Sinos River Basin. Simultaneously, negative controls were made and climatic data were recorded. Micronuclei (MCN) frequencies were determined in young tetrads of pollen mother cells and expressed as MCN/100 tetrads. Significantly higher MCN frequencies were observed in buds exposed in urban and riparian forest environments in Taquara (up to 7.23 and 4.80, respectively) and Campo Bom (up to 4.90 and 4.23, respectively) than in buds exposed in Caraá (up to 2.90 and 2.50, respectively), in the majority of samplings, and in relation to the negative control (up to 1.93) in all months. Over the course of the period monitored, there were significant variations in MCN frequencies at all sampling points, with the exception of the urban environment in Caraá. For the urban environments, relation between the MCN frequency, vehicular traffic and mean temperature was observed. For the riparian forest fragments, there was no association between MCN frequency and climatic factors. Tradescantia pallida var. purpurea can be considered a useful tool to point out areas with increased atmospheric pollution, since the exposure of plants under severe climatic conditions is avoided to minimize their negative influence on the formation of micronuclei.

Resumo O presente estudo avaliou os efeitos genotóxicos do ar atmosférico sobre Tradescantia pallida var. purpurea em áreas urbanas com diferentes intensidades de tráfego veicular e em fragmentos de mata ciliar na Bacia do Rio dos Sinos (Rio Grande do Sul, Brasil), considerando a influência de condições climáticas prevalecentes nesses ambientes. Bimensalmente, de maio de 2012 a março de 2013, ramos com botões florais foram expostos por 8 h em ambientes urbanos e de mata ciliar nos municípios de Caraá, Taquara e Campo Bom nos trechos superior, médio e inferior, respectivamente, da Bacia do Rio dos Sinos. Simultaneamente, foram realizados controles negativos e levantados dados climáticos. Frequências de micronúcleos (MCN) foram determinadas em tétrades jovens de células-mãe de grãos de pólen e expressas como MCN/100 tétrades. Frequências de MCN significativamente superiores foram observadas em botões expostos nos ambientes urbanos e de matas ciliares em Taquara (até 7,23 e 4,80, respectivamente) e Campo Bom (até 4,90 e 4,23, respectivamente) do que em botões expostos em Caraá (até 2,90 e 2,50, respectivamente), na maioria das amostragens, e em relação ao controle negativo (até 1,93) em todos os meses. Ao longo do período monitorado, ocorreram variações significativas nas frequências de MCN em todos os pontos amostrais, com exceção do ambiente urbano de Caraá. Para os ambientes urbanos, foi observada relação entre a frequência de MCN, tráfego veicular e temperatura média. Para os fragmentos de mata ciliar, não houve associação entre a frequência de MCN e fatores climáticos. Tradescantia pallida var. purpurea pode ser considerada uma ferramenta útil para apontar áreas com poluição atmosférica aumentada, desde que, sob condições climáticas severas, a exposição das plantas seja evitada, para minimizar o efeito destas sobre a formação de micronúcleos.